Исследование остатков наркотических средств в потожировых выделениях и слюне проводят методами тонкослойной хроматографии и методом хромато-масс- спектрометрии при использовании режима электронного удара при 70 эВ с последующим сканированием в диапазоне от 50 до 550 m/z масс. ГЛАВА VII ______________________________________________________________________________ 81 7.1.1. Подготовка образцов к анализу Экстракция веществ с поверхности объектов Представленные на исследование образцы волос и ногтей настаивают с этанолом (или метанолом) в течение 4 часов при комнатной температуре. Затем спиртовые вытяжки фильтруют и упаривают досуха на роторном испарителе при +40°С. Сухой остаток растворяют в 50—200 мкл этанола (или метанола). В качестве контроля используют смывы с образцов волос и ногтей лабораторного персонала, полученные аналогичным способом. Подготовка образцов слюны и потожировых выделений Слюну или потожировые выделения, нанесённые на марлевые или ватные тампоны, экстрагируют методом мацерации 75-ю мл этанола (или метанола) в течение 4 часов Затем спиртовые вытяжки фильтруют и упаривают досуха на роторном испарителе при +40°С. Сухой остаток растворяют в 50—200 мкл этанола (или метанола). В качестве контроля используют смывы с рук, лица и шеи лабораторного персонала, полученные аналогичным способом. Предварительное исследование Для проведения предварительных исследований этанольные вытяжки в количестве 5 мкл наносят на хроматографические пластины для высокоэффек- тивной тонкослойной хроматографии с Кизельгелем 60 254, производства фирмы «МЕРК» (Германия), размером 10 на 10 см. Одновременно на пластины в качестве метчиков наносят стандартные растворы 100 мкг/мл исследуемых веществ в этаноле. Количество наносимых метчиков определяется экспертом в каждом конкретном случае в зависимости от количества исследуемого образца, обстоятельств дела и прочих причин. Хроматографирование рекомендуется проводить в системах: 1) метанол концентрированный аммиак 100 1,5 2) циклогексан толуол . диэтиламин 75 15 10 После удаления растворителя пластинки просматривают в УФ-свете при =254 и =366 нм. Обработку пластин рекомендуется проводить одним из ниже- перечисленных реактивов: 1. Реактив Марки (раствор формальдегида в серной кислоте). 2. Реактив Драгендорфа (раствор висмута субнитрата и йодида калия в разбав- ленной уксусной кислоте). 3. Раствор йодплатината (раствор хлорида платины и йодида калия в разбав- ленной соляной кислоте). При обнаружении на хроматограммах хроматографических зон, совпадающих по значению Rf, поглощению в УФ-свете и характеру окрашивания после обра- ботки предлагаемыми реактивами с хроматографическими зонами стандартных растворов наркотических средств, проводят подтверждающее исследование методом хромато-масс-спектрометрии. Появление на пластинах после обработки приве- дёнными выше реактивами окрашенных хроматографических зон, не совпада- ющих по значению Rf с метчиками, также является причиной для проведения хромато-масс-спектрометрии.
2010
МЕТОДИКА ОБНАРУЖЕНИЯ В ПОТОЖИРОВЫХ ВЫДЕЛЕНИЯМ, ВОЛОСАХ И НОГТЯХ НАРКОТИЧЕСКИХ И ПСИХОТРОПНЫХ ВЕЩЕСТВ
Выделения человека, особенно кровь, моча, а также секционный
материал, являются обычными объектами исследования для
установления факта употребления вещества или простого контакта с контролиру-
емым веществом. Уровень содержания наркотиков в этих объектах может быть
определён лишь в течение 3—5 дней после приёма. Нетрадиционные образцы:
ногти и волосы удерживают наркотики и их метаболиты в течение более продолжи-
тельного времени (месяцы и годы). далее…
2010
Приведённая здесь ме- тодика разработана и активно используется для выявления лиц, употреблявших наркотические средства или имевших контакт с ними. Как показывает практика, в ходе таких проверок процент положительных результатов обычно относи- тельно невелик — от 2 до 10. Ниже приведён типичный пример такого исследования. В 1997 г. в ходе проведения следственных мероприятий по пресечению незаконной деятельности преступной группы, занимав- шейся незаконным производством и распрос- транением наркотиков амфетаминового ряда, у 4 подозреваемых были изъяты образцы мочи, потожировых выделений с рук и лица, а также волосы на предмет установления в них присутствия наркотических средств. далее…
2010
Выведение кокаина с мочой в значительной степени зависит от её уровня рН 28, 46, 86, 88, 90, 95, 116, 124, 182. От 1 до 9 % введённой дозы кокаина выводится в неизменённом виде с мочой, что позволяет обнаруживать его в моче большинством методов только в течение нескольких часов. Основными метаболитами кокаина в моче являются бензоилэкгонин (29— 54 %) и метиловый эфир экгонина (26—60 %). Кроме этих веществ в моче обнаруживаются следовые количества других продуктов разрушения кокаина в организме. К настоящему времени в моче наркоманов, кроме указанных веществ, идентифицировано еще 12 метаболитов кокаина, таких как экгонин, экгонидин, норкокаин и другие. Некоторые из них обладают фармакологической активностью, например норкокаин. Концентрация последнего в моче спустя 4 часа после внутривенного приёма 100 мг кокаина составляет 3—87 нгмл 86, 124, 247. Уровни бензоилэкгонина в моче после принятия внутривенно дозы кокаина гидрохлорида 1,5 мгкг в первые сутки превышают 10 мкгмл. Внутривенная доза в 20 мг этого наркотика может быть обнаружена в моче мужчин ЕМГГ-методом в течение 40 часов при пределе обнаружения в 300 нгмл. При интраназальной дозе кокаина гидрохлорида 1,5 мгкг более чувствительным яляется метод РИА, предел обнаружения которого составил 25 нгмл. далее…
2010
Вопросам накопления никотина и его основ ного метаболита котинина в волосах и разработке методов иммунного и хромато-масс-спектрального их обнаружения посвящены следующие работы: 114, 135, 150, 176, 205, 217, 219, 224, 231, 236, 269, 270, 349. Определение никотина и котинина в волосах и ногтях является важным условием установления вредных привычек человека. Методика обнаружения этих веществ, разработанная нами, позволяет надёжно анализировать на присутствие данных веществ как биожидкости, так и волосы и ногти.
2010
К 5 мл водного раствора образца или калибровочного раствора добавляют 200 мг карбоната натрия и 0,2 мл раствора дансилхлорида (0,1%) в ацетоне. Полученную смесь выдерживают 1,5—2 часа при комнатной температуре в тёмном месте. После этого её экстрагируют 2 раза по 5 мл хлороформом. Хлороформные экстракты объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают на роторном испарителе или в токе азота при температуре +40°С досуха.
2010
Для проведения предварительных исследований этанольные вытяжки в количестве 5—20 мкл наносят на хроматографические пластины для высокоэффективной тонкослойной хроматографии размером 10×10 см с Кизельгелем 60 254, производства фирмы «МЕРК» (Германия). Импортные пластины могут быть заменены отечественными, например, «СОРБФИЛ ПТСХ П-А-УФ». Однако, при этом значения Rf могут измениться. Одновременно на пластины в качестве метчиков наносят стандартные растворы 100 мкгмл исследуемых веществ в этаноле. Количество наносимых метчиков определяется экспертом в каждом конкретном случае в зависимости от количества исследуемого образца, обстоятельств дела и проч. В качестве подвижных систем растворителей рекомендуются: 1) хлороформ : ацетон : этанол : аммиак в пропорции 20 : 20 : 3 : 1; 2) толуол : этанол : триэтиламин (диэтиламин) — 9:1:1. После удаления остатков системы растворителей пластины сушат при температуре +40°С, просматривают в УФ-свете при Ая=254 и 366 нм и обрабатывают реактивами, отмечая получаемую окраску и вычисляя значения Rf. Обнаружение исследуемых веществ рекомендуется проводить следующими реактивами: реактив Марки (раствор формальдегида в концентрированной серной кислоте); раствор нингидрина в ацетоне (0,5 г нингидрина в 40 мл ацетона с нагреванием до +70°С в течение 5—8 мин.)- Ацетон может быть заменён на этилацетат или этанол. Однако при этом результаты ухудшаются. При обнаружении на хроматограммах хроматографических зон, совпадающих по значению Rf, поглощению в УФ-свете и характеру окрашивания после обработки предлагаемыми реактивами с хроматографическими зонами стандартных растворов наркотических средств, проводят подтверждающее исследование экстрактов после обработки их трифторуксусным ангидридом методом хромато-масс-спектрометрии в режиме сканирования масс-спектров. Появление на пластинах после обработки приведёнными выше реактивами окрашенных хроматографических зон, не совпадающих по значению Rf с метчиками, также является причиной для проведения исследований методом хромато-масс-спектрометрии.
2010
Для получения воспроизво димьгх результатов хромато-графические пластины перед нанесением исследуемых растворов дважды хроматографируют в метаноле и сушат при комнатной температуре до полного удаления следов растворителя. Хроматографические пластины маркируют соответствующим образом и на них количественно переносят исследуемые образцы и калибровочные растворы. Образцы наносят мерными капиллярами или микрошприцами на расстоянии 1 см от края пластины и друг от друга. При проведении количественных расчётов на каждую пластинку наносят 5 различных по концентрации калибровочных растворов и 4 повтора исследуемого образца, что позволяет проводить калибровку и математическую обработку результатов.
2010
При внутривенном введении морфина максимальный фармакологический эффект достигается через несколько минут, при подкожном и внутримышечном введении — через 15 минут. В дальнейшем содержание морфина в крови резко падает. Около 80 % от введённой дозы выделяется с мочой в течение 8 часов. Однако следы морфина можно обнаружить в моче спустя 72—100 часов. Время полувыведения морфина составляет 2—3 часа. Рисунок 9 представляет основные пути метаболизма морфина. После парентерального введения морфина за 24 часа выделяется с мочой до 85—90 % введённой дозы, из которых 2—12 % свободного морфина; 65—70 % морфин-3и морфин-6-глюкуронидов; до 10 % сульфатных конъюгатов; 1 % норморфина и 3 % глюкуронида норморфина. При пероральном приёме через 24 часа с мочой выводится 64—90 % дозы, причём менее 3 % неизменённого морфина. При рассмотрении продукта метаболизма морфина следует учитывать тот факт, что данное вещество образуется в ощутимых количествах при метаболизме других опиатов: кодеина, героина, дионина и других.
2010
Предлагаемая экспертная методика позволяет отделить потребителей наркотических средств (наркоманов) от лиц, занимающихся распространением, сбытом и изготовлением наркотиков, а также от лиц, имевших контакт с наркотическим средством. Выявление остаточных количеств наркотических средств в слюне или потожировьгх выделениях и прочих загрязнениях на поверхности кожи, волос или ногтей при их отсутствии в отмытых от посторонних примесей волосах и ногтевых срезах указывает на факт контакта проверяемого лица с наркотическим средством. Случай выявления наркотических средств в отмытых от посторонних загрязнений волосах и ногтевых срезах может указывать на вероятность употребления лицом наркотического средства. Однако окончательная постановка такого диагноза остаётся за врачом-наркологом. Установление продолжительности и интенсивности потребления наркотика является одним из важных достоинств данной методики и проводится методом секционного анализа. С этой целью пучки волос нарезаются на отдельные части длиной 10 мм и исследуются по разработанной экспертной методике. Получаемые результаты указывают на динамику потребления этого вещества.