Методы обнаружения наркотиков.

Предлагаемая экспертная методика позволяет отделить потребителей наркотических средств (наркоманов) от лиц, занимающихся распространением, сбытом и изготовлением наркотиков, а также от лиц, имевших контакт с наркотическим средством. Выявление остаточных количеств наркотических средств в слюне или потожировьгх выделениях и прочих загрязнениях на поверхности кожи, волос или ногтей при их отсутствии в отмытых от посторонних примесей волосах и ногтевых срезах указывает на факт контакта проверяемого лица с наркотическим средством. Случай выявления наркотических средств в отмытых от посторонних загрязнений волосах и ногтевых срезах может указывать на вероятность употребления лицом наркотического средства. Однако окончательная постановка такого диагноза остаётся за врачом-наркологом. Установление продолжительности и интенсивности потребления наркотика является одним из важных достоинств данной методики и проводится методом секционного анализа. С этой целью пучки волос нарезаются на отдельные части длиной 10 мм и исследуются по разработанной экспертной методике. Получаемые результаты указывают на динамику потребления этого вещества.

Для проведения предварительных исследований этанольные вытяжки в количестве 5 мкл наносят на хроматографические пластины для высокоэффективной тонкослойной хроматографии с Кизельгелем 60 254, производства фирмы «МЕРК» (Германия), размером 10 на 10 см. Одновременно на пластины в качестве метчиков наносят стандартные растворы 100 мкгмл исследуемых веществ в этаноле. Количество наносимых метчиков определяется экспертом в каждом конкретном случае в зависимости от количества исследуемого образца, обстоятельств дела и прочих причин. Хроматографирование рекомендуется проводить в системах: 1) метанол концентрированный аммиак  100 1,5 2)циклогексан толуол.диэтиламин           75 15 10 После удаления растворителя пластинки просматривают в УФ-свете при Х=254 и =366 нм. Обработку пластин рекомендуется проводить одним из нижеперечисленных реактивов: 1.         Реактив Марки (раствор формальдегида в серной кислоте). 2.         Реактив Драгендорфа (раствор висмута субнитрата и йодида калия в разбавленной уксусной кислоте). 3.         Раствор йодплатината (раствор хлорида платины и йодида калия в разбавленной соляной кислоте). При обнаружении на хроматограммах хроматографических зон, совпадающих по значению Rf, поглощению в УФ-свете и характеру окрашивания после обработки предлагаемыми реактивами с хроматографическими зонами стандартных растворов наркотических средств, проводят подтверждающее исследование методом хромато-масс-спектрометрии. Появление на пластинах после обработки приведёнными выше реактивами окрашенных хроматографических зон, не совпадающих по значению Rf с метчиками, также является причиной для проведения хромато-масс-спектрометрии.

Отмытые по приведённой выше методике волосы и ногти сушат при комнатной температуре. Отбирают навеску 30 мг образца, которые далее обрабатывают следующим образом: Выделение исследуемых веществ органическим растворителем Навески образцов заливают 1 мл метанола и обрабатывают ультразвуком не менее 1 часа при проведении качественных исследований и не менее 6 часов при количественном исследовании. После этого жидкость сливают. Образцы промывают метанолом, и объединённые метанольные экстракты упаривают досуха. Измельчение образцов в ступке пестиком с применением битого стекла может ускорить процесс выделения исследуемых веществ. Однако при этом также увеличивается выход соэкстрактивных веществ. с исполь-

Представленные на исследование образцы волос и ногтей настаивают с этанолом (или метанолом) в течение 4 часов при комнатной температуре. Затем спиртовые вытяжки фильтруют и упаривают досуха на роторном испарителе при +40°С. Сухой остаток растворяют в 50—200 мкл этанола (или метанола). В качестве контроля используют смывы с образцов волос и ногтей лабораторного персонала, полученные аналогичным способом. Подготовка образцов слюны и потожировых выделений Слюну или потожировые выделения, нанесённые на марлевые или ватные тампоны, экстрагируют методом мацерации 75-ю мл этанола (или метанола) в течение 4 часов Затем спиртовые вытяжки фильтруют и упаривают досуха на роторном испарителе при +40°С. Сухой остаток растворяют в 50—200 мкл этанола (или метанола). В качестве контроля используют смывы с рук, лица и шеи лабораторного персонала, полученные аналогичным способом.

Исследование проводят на газовом хромато графе, оборудованном кварцевой капиллярной колонкой с неполярной неподвижной фазой. Для обнаружения соединений используют масс-селективный детектор. Для проведения работ рекомендуется следующее оборудование фирмы «Хьюлетт Паккард» США: 7. Газохроматографическая колонка ULTRA-], ULTRA-2, HP-1, HP-5или HP-5MSс внутренним диаметром 0,1 или 0,25мм и длиной 10—30метров. 2.         Газовый хроматограф серии НР5890или НР6890. 3.         Масс-селективный детектор НР5970 или его более новые аналоги. Расход газа-носителя и температурные условия подбираются индивидуально в зависимости от применяемой хроматографической системы на основании параметров удерживания исследуемых веществ. Типовые условия проведения исследований: 1.         Хроматограф НР5890с колонкой НР-1 внутренним диаметром 0,25мм и длиной 30 метров. 2.         Газ-носитель: гелий. 3.         Скорость расхода газа-носителя: 1,4млмин.        ц 4.         Температура инжектора и интерфейса 240и 280°Ссоответственно. 5.         Температура колонки программируется от 100до 270°Ссо скоростью 20град.мин. 6.         Объём пробы 1—Змкл. 7.         Способ введения: без деления потока газа-носителя. После проведения исследований масс-спектры, снятые с вершин хроматогра-фических пиков, сравнивают по стандартной методике с масс-спектрами библиотек «NIST98» и «WILEY275K» производства фирмы «Хьюлетт Паккард» (США). Вещество считается идентифицированными при совпадении его масс-спектра с библиотечным более чем на 90 % и совпадении его времени удерживания со временем удерживания стандарта идентифицируемого вещества.

Выделения человека, особенно кровь, моча, а также секционный материал, являются обычными объектами исследования для установления факта употребления вещества или простого контакта с контролируемым веществом. Уровень содержания наркотиков в этих объектах может быть определён лишь в течение 3—5 дней после приёма. Нетрадиционные образцы: ногти и волосы удерживают наркотики и их метаболиты в течение более продолжительного времени (месяцы и годы). Лёгкость получения образцов и устойчивость наркотиков при нахождении в них подчеркивают «превосходство» над биологическими жидкостями человека. Например, образцы волос, ногтей, слюны, пота можно легко отбирать, не посягая на права человека, в противоположность отбору крови.

Разработка высокочувствительных и специфических методов иммунохимии и хромато-масс-спектрометрии, позволяющих определять незначительные концентрации наркотиков, стимулировали разработку методов исследования таких нетрадиционных образцов, как волосы и ногти. Основными преимуществами волос, ногтей и потожировых выделений человека как объектов исследования с целью установления присутствия остатков лекарственных препаратов и наркотиков являются: 1.         Возможность устанавливать в организме человека факт употребления наркотиков спустя недели, месяцы или даже годы после окончания их приёма. 2.         Возможность прослеживать во времени динамику поступления наркотика или лекарственного средства в организм. 3.Возможность осуществления скрытого отбора образцов, главным образом образцов волос и потожировых выделений на предметах одежды при проведении оперативно-розыскныхмероприятий. 4.         Возможность исследования широкого диапазона концентраций наркотических и лекарственных средств — от субтерапевтических до сублетальных. 5.         Возможность проведения комплексной оценки объектов, так как данные,получаемые при исследовании волос, ногтей, а также потожировыхвыделений и прочихзагрязнений на них, взаимодополняют иуглубляют друг друга. 6.Простотаотбора ихраненийпроб.

Исследование остатков наркотических средств в отмытых от посторонних примесей образцах волос и ногтей проводят методом хромато-масс-спектро-метрии при использовании режима электронного удара при 70 эВ с последующим детектированием характеристических для исследуемых веществ ионов.

Для удаления внешних загрязнений волосы и ногти отмывают 2N раствором хлористоводородной кислоты и метанолом (или этанолом) до полного исчезновения в последнем растворителе, после его упаривания, следов наркотического средства. Присутствие исследуемых веществ определяют по описанной выше методике хромато-масс-спектрального исследования, за исключением того, что прибор работает в режиме регистрации характеристических для исследуемых веществ или их трифторуксусных производных (далее ТФА-производных) ионов. Таблица 19 показывает время удерживания и характеристические ионы исследуемых веществ. По данной методике вещество считают идентифицированным при совпадении времени удерживания всех характеристических ионов, а также соотношения площадей их хроматографических пиков с аналогичными показателями стандартного образца Количество исследуемых характеристических ионов для каждого вещества определяется экспертом на основании выбранных им условий хроматографирования и используемого оборудования. При проведении экспертных исследований данное количество не может быть меньше 3. Отсутствие одного хроматографического пика характеристического иона в пределах 1,2 сек. времени удерживания при наличии всех других пиков указывает на отсутствие данного соединения в пробе. Разработанная методика при исследовании образцов волос весом 30 мг и ногтей весом 20 мг надёжно выявляет искомые вещества на уровне 0,5 нгмг. Рисунок 33 показывает графики количественного определения в волосах кокаина, героина, метадона, фенцик- лидина, морфина 2ТФА и героина. Соответствующие данным графикам статистические параметры уравнения линейной регрессии (Y=AX+B) представляет таблица 20.

Навески разрушают в ступке пестиком с использованием битого стекла. Полученные гомогенаты настаивают с 1 мл 6N соляной кислоты в течение 6 часов при постоянном перемешивании при температуре +80°С. Затем надосадочную жидкость отделяют от образцов. Оставшиеся образцы промывают 1 мл дистиллированной воды. и экстрагируют 3 раза двумя мл смеси Объединённые хлороформные вытяжки сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают досуха. Эта методика приводит к гидролизу героина и его моноацетильных метаболитов до морфина. В результате происходит увеличение чувствительности метода в целом при снижении его селективности. Выбор конкретной методики исследований проводится экспертом на основании анализа обстоятельств дела и поставленных перед ним вопросов.

Получение ТФА-производных проводят по следующей методике: после удаления растворителя к сухому остатку экстракта добавляют 100 мкл ангидрида трифторуксусной кислоты и нагревают при +80°С в течение 10 минут. После этого смесь охлаждают и упаривают в токе инертного газа или воздуха. Сухой остаток растворяют в 100 мкл этилацетата.