Методы обнаружения наркотиков.

К 5 мл водного раствора образца или калибровочного раствора добавляют 200 мг карбоната натрия и 0,2 мл раствора дансилхлорида (0,1%) в ацетоне. Полученную смесь выдерживают 1,5—2 часа при комнатной температуре в тёмном месте. После этого её экстрагируют 2 раза по 5 мл хлороформом. Хлороформные экстракты объединяют, сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают на роторном испарителе или в токе азота при температуре +40°С досуха.

Для получения воспроизво димьгх результатов хромато-графические пластины перед нанесением исследуемых растворов дважды хроматографируют в метаноле и сушат при комнатной температуре до полного удаления следов растворителя. Хроматографические пластины маркируют соответствующим образом и на них количественно переносят исследуемые образцы и калибровочные растворы. Образцы наносят мерными капиллярами или микрошприцами на расстоянии 1 см от края пластины и друг от друга. При проведении количественных расчётов на каждую пластинку наносят 5 различных по концентрации калибровочных растворов и 4 повтора исследуемого образца, что позволяет проводить калибровку и математическую обработку результатов.

Денситометрическое определение проводили на приборе TLC- HPTLC CAMAG-SCANNER (Германия) при сканировании с длиной волны 313 нм и использовании ртутной лампы и рекомендованного фирмой- производителем светофильтра. Рисунок 26 показывает типичную денситограмму дансилморфина при концентрации 50 нг в пятне. Калибровочная кривая для количественного определения этого вещества приведена на рисунке ниже. Таблица 15 показывает сравнительную характеристику трёх представленных методов определения морфина в моче (искусственная добавка). Предел обнаружения дансилморфина составил 0,5 нг в пятне, дансильных производных амфетамина и первитина — 2,5—5,0 нг в пятне.

Ниже приведены основные способы проведения дансилирования исследуемых веществ. При изменении объёма исследуемого образца следует соответственно изменять количество реактива. Наиболее общей является методика прямого данси-лирования, при которой можно получать дансильные производных всех исследуемых веществ. Экстрактивное дансилирование даёт и большой выигрыш во времени, и больший процент извлечения. Однако, эта методика в представленном варианте применима только к морфину.

Сухие остатки после экстракции исследуемых объектов растворяют в 5 мл подкисленной воды. Далее поступают, как описано в разделах о прямом или экстрактивном дансилировании

При исследовании используют пластины для высокоэффективной тонкослойной хроматографии с силикагелем на стеклянной или пластиковой основе, например, выпускаемые фирмой «Merck» (Германия) марки HPTLC G 60 размером 10×10 см. Приведённые ниже параметры удерживания были получены на этих пластинах. При переходе на пластины других производителей значения Rf исследуемых веществ могут изменяться. Разделение проводят в вертикальных или горизонтальных камерах, насыщенных парами хроматографической системы. Денситометрическое определение проводят с использованием стандартного оборудования, позволяющего проводить сканирование пластин с измерением отражения в УФ-свете или флуоресценции при заданных длинах волн. Данное оборудование должно позволять измерять площадь и интенсивность хромато-графических зон при заданных параметрах, производить построение калибровочных графиков, расчёт по ним количества анализируемых веществ и статистическую обработку результатов.

Методика предназначена для обнаружения и количественного определения морфина, амфетамина и первитина на поверхности различных предметов, а также в объектах биологического происхождения методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии дансильных производных. Количественное определение производится на основании сравнения интенсивности флуоресценции хроматографических зон исследуемых объектов и стандартных растворов, визуально или с применением денситометра. Получение дансильных производных исследуемых веществ может производиться несколькими способами: дансилирование сухих остатков после экстракции исследуемых объектов; непосредственное, прямоедан-силирование водных растворов или биожидкостей; экстрактивное дансили-рование при исследовании на морфин. Методика может использоваться при исследовании смывов, полученных с поверхности кожи рук и лица, биожидкостей, волос и ногтей лиц, подозреваемых в участии в незаконном обороте наркотиков, а также смывов с поверхности различных предметов, например, весов или различных ёмкостей, сумок и прочего.

Калибровочные растворы готовят в воде или в исследуемой биожидкости, доводя содержание морфина гидрохлорида от 2,5 до 25 мкгмл и амфетамина и первитина от 10 до 50 мкгмл. Для этого эталонный раствор, содержащий 1 мгмл вещества, последовательно разводят в жидкости до нужной концентрации. По 5 мл калибровочных растворов каждой концентрации дансилируют в соответствии с приведённой ниже методикой. Сухой осадок растворяют в 5 мл хлороформа и наносят 1 мкл полученного раствора на хроматографические пластины.

К 5 мл водного раствора образца или калибровочного раствора добавляют 0,1 мл 0,2М раствора тетрабути-ламмония гидроокиси в 1М растворе едкого натра и 0,2 мл раствора одного мг дансилхлорида в одном мл хлороформа Смесь встряхивают в течение 10 минут Слой органического растворителя сушат над безводным сульфатом натрия и упаривают на роторном испарителе или в токе азота при температуре +40°С досуха.