Исследование остатков наркотических средств в потожировых выделениях и слюне проводят методами тонкослойной хроматографии и методом хромато-масс- спектрометрии при использовании режима электронного удара при 70 эВ с последующим сканированием в диапазоне от 50 до 550 m/z масс. ГЛАВА VII ______________________________________________________________________________ 81 7.1.1. Подготовка образцов к анализу Экстракция веществ с поверхности объектов Представленные на исследование образцы волос и ногтей настаивают с этанолом (или метанолом) в течение 4 часов при комнатной температуре. Затем спиртовые вытяжки фильтруют и упаривают досуха на роторном испарителе при +40°С. Сухой остаток растворяют в 50—200 мкл этанола (или метанола). В качестве контроля используют смывы с образцов волос и ногтей лабораторного персонала, полученные аналогичным способом. Подготовка образцов слюны и потожировых выделений Слюну или потожировые выделения, нанесённые на марлевые или ватные тампоны, экстрагируют методом мацерации 75-ю мл этанола (или метанола) в течение 4 часов Затем спиртовые вытяжки фильтруют и упаривают досуха на роторном испарителе при +40°С. Сухой остаток растворяют в 50—200 мкл этанола (или метанола). В качестве контроля используют смывы с рук, лица и шеи лабораторного персонала, полученные аналогичным способом. Предварительное исследование Для проведения предварительных исследований этанольные вытяжки в количестве 5 мкл наносят на хроматографические пластины для высокоэффек- тивной тонкослойной хроматографии с Кизельгелем 60 254, производства фирмы «МЕРК» (Германия), размером 10 на 10 см. Одновременно на пластины в качестве метчиков наносят стандартные растворы 100 мкг/мл исследуемых веществ в этаноле. Количество наносимых метчиков определяется экспертом в каждом конкретном случае в зависимости от количества исследуемого образца, обстоятельств дела и прочих причин. Хроматографирование рекомендуется проводить в системах: 1) метанол концентрированный аммиак 100 1,5 2) циклогексан толуол . диэтиламин 75 15 10 После удаления растворителя пластинки просматривают в УФ-свете при =254 и =366 нм. Обработку пластин рекомендуется проводить одним из ниже- перечисленных реактивов: 1. Реактив Марки (раствор формальдегида в серной кислоте). 2. Реактив Драгендорфа (раствор висмута субнитрата и йодида калия в разбав- ленной уксусной кислоте). 3. Раствор йодплатината (раствор хлорида платины и йодида калия в разбав- ленной соляной кислоте). При обнаружении на хроматограммах хроматографических зон, совпадающих по значению Rf, поглощению в УФ-свете и характеру окрашивания после обра- ботки предлагаемыми реактивами с хроматографическими зонами стандартных растворов наркотических средств, проводят подтверждающее исследование методом хромато-масс-спектрометрии. Появление на пластинах после обработки приве- дёнными выше реактивами окрашенных хроматографических зон, не совпада- ющих по значению Rf с метчиками, также является причиной для проведения хромато-масс-спектрометрии.
Архив меток » вещества «
2010
Kintz P. с соавторами разработали метод одновременного определения в волосах человека амфетамина, метамфетамина, МДА и МДМА с использованием ГХ-МС 209. С помощью этого метода они исследовали волосы с различных участков тела 24-летнего мужчины, в анамнезе которого было указано систематическое потребление стимуляторов. Результаты исследования приведены в таблице. Таким образом, употребление амфетамина и метамфетамина может быть выявлено спустя продолжительное время после окончания их приёма путём исследования волос и ногтей. Концентрация веществ в указанных объектах зависит от принятой дозы, но при этом могут наблюдаться значительные индивидуальные отклонения. Для аналогичного вывода о метилендиоксиамфетаминах в доступной нам литературе данных недостаточно. Обнаружение в волосах метаболитов наркотиков рассматриваемого химического класса затруднено из-за незначительной их концентрации.
2010
Ниже приведены основные способы проведения дансилирования исследуемых веществ. При изменении объёма исследуемого образца следует соответственно изменять количество реактива. Наиболее общей является методика прямого данси-лирования, при которой можно получать дансильные производных всех исследуемых веществ. Экстрактивное дансилирование даёт и большой выигрыш во времени, и больший процент извлечения. Однако, эта методика в представленном варианте применима только к морфину.
2010
Биологические пробы отбирают в соответствии с «Положением о правилах отбора проб на обнаружение алкоголя, наркотических средств, психотропных и других токсических веществ» (Приложение № 2 к приказу МЗ России № 289 от 05.10.98 г., см. приложение IV).
2010
При исследовании используют пластины для высокоэффективной тонкослойной хроматографии с силикагелем на стеклянной или пластиковой основе, например, выпускаемые фирмой «Merck» (Германия) марки HPTLC G 60 размером 10×10 см. Приведённые ниже параметры удерживания были получены на этих пластинах. При переходе на пластины других производителей значения Rf исследуемых веществ могут изменяться. Разделение проводят в вертикальных или горизонтальных камерах, насыщенных парами хроматографической системы. Денситометрическое определение проводят с использованием стандартного оборудования, позволяющего проводить сканирование пластин с измерением отражения в УФ-свете или флуоресценции при заданных длинах волн. Данное оборудование должно позволять измерять площадь и интенсивность хромато-графических зон при заданных параметрах, производить построение калибровочных графиков, расчёт по ним количества анализируемых веществ и статистическую обработку результатов.
2010
Навески образцов заливают метанолом из расчета 1 мл на каждые 50 мг объекта и обрабатывают ультразвуком не менее 1 часа при проведении качественных исследований и не менее 6 часов при количественном исследовании. После этого жидкость сливают. Образцы промывают метанолом, и объединённые метанольные экстракты упаривают досуха. Измельчение образцов в ступке пестиком с применением битого стекла может ускорить процесс выделения исследуемых веществ. Однако при этом также увеличивается выход соэкстрактивных веществ.
2010
Методика предназначена для обнаружения и количественного определения морфина, амфетамина и первитина на поверхности различных предметов, а также в объектах биологического происхождения методом высокоэффективной тонкослойной хроматографии дансильных производных. Количественное определение производится на основании сравнения интенсивности флуоресценции хроматографических зон исследуемых объектов и стандартных растворов, визуально или с применением денситометра. Получение дансильных производных исследуемых веществ может производиться несколькими способами: дансилирование сухих остатков после экстракции исследуемых объектов; непосредственное, прямоедан-силирование водных растворов или биожидкостей; экстрактивное дансили-рование при исследовании на морфин. Методика может использоваться при исследовании смывов, полученных с поверхности кожи рук и лица, биожидкостей, волос и ногтей лиц, подозреваемых в участии в незаконном обороте наркотиков, а также смывов с поверхности различных предметов, например, весов или различных ёмкостей, сумок и прочего.
2010
Калибровочные растворы готовят в воде или в исследуемой биожидкости, доводя содержание морфина гидрохлорида от 2,5 до 25 мкгмл и амфетамина и первитина от 10 до 50 мкгмл. Для этого эталонный раствор, содержащий 1 мгмл вещества, последовательно разводят в жидкости до нужной концентрации. По 5 мл калибровочных растворов каждой концентрации дансилируют в соответствии с приведённой ниже методикой. Сухой осадок растворяют в 5 мл хлороформа и наносят 1 мкл полученного раствора на хроматографические пластины.
2010
Полученный сухой остаток исследуют методом ГХ-МС, как описано в разделе 6.3., однако масс-спектрометр работает в режиме регистрации характеристических ионов исследуемых веществ. Заключение о присутствии исследуемого соединения давали на основании совпадения времён удерживания и соотношения площадей пиков характеристических ионов, соответствующих соотношению их интенсивности в масс-спектре, полученном в режиме сканирования, для исследуемого вещества и стандарта-сравнения. Определению исследуемых веществ не мешают: никотин, котинин, кофеин, фенциклидин, фенобарбитал, метадон, кокаин, морфин 2ТФА, кодеин ТФА, 6-МАМ ТФА, каннабидиол, тетрагидроканнабинол, ацетилкодеин, каннабинол, морфин 2Ас, папаверин, а также другие вещества экзо – и эндогенного характера.