Для проведения предварительных исследований этанольные вытяжки в количестве 5—20 мкл наносят на хроматографические пластины для высокоэффективной тонкослойной хроматографии размером 10×10 см с Кизельгелем 60 254, производства фирмы «МЕРК» (Германия). Импортные пластины могут быть заменены отечественными, например, «СОРБФИЛ ПТСХ П-А-УФ». Однако, при этом значения Rf могут измениться. Одновременно на пластины в качестве метчиков наносят стандартные растворы 100 мкгмл исследуемых веществ в этаноле. Количество наносимых метчиков определяется экспертом в каждом конкретном случае в зависимости от количества исследуемого образца, обстоятельств дела и проч. В качестве подвижных систем растворителей рекомендуются: 1) хлороформ : ацетон : этанол : аммиак в пропорции 20 : 20 : 3 : 1; 2) толуол : этанол : триэтиламин (диэтиламин) — 9:1:1. После удаления остатков системы растворителей пластины сушат при температуре +40°С, просматривают в УФ-свете при Ая=254 и 366 нм и обрабатывают реактивами, отмечая получаемую окраску и вычисляя значения Rf. Обнаружение исследуемых веществ рекомендуется проводить следующими реактивами: реактив Марки (раствор формальдегида в концентрированной серной кислоте); раствор нингидрина в ацетоне (0,5 г нингидрина в 40 мл ацетона с нагреванием до +70°С в течение 5—8 мин.)- Ацетон может быть заменён на этилацетат или этанол. Однако при этом результаты ухудшаются. При обнаружении на хроматограммах хроматографических зон, совпадающих по значению Rf, поглощению в УФ-свете и характеру окрашивания после обработки предлагаемыми реактивами с хроматографическими зонами стандартных растворов наркотических средств, проводят подтверждающее исследование экстрактов после обработки их трифторуксусным ангидридом методом хромато-масс-спектрометрии в режиме сканирования масс-спектров. Появление на пластинах после обработки приведёнными выше реактивами окрашенных хроматографических зон, не совпадающих по значению Rf с метчиками, также является причиной для проведения исследований методом хромато-масс-спектрометрии.
Архив меток » массы «
2010
2010
Для проведения предварительных исследований этанольные вытяжки в количестве 5 мкл наносят на хроматографические пластины для высокоэффективной тонкослойной хроматографии с Кизельгелем 60 254, производства фирмы «МЕРК» (Германия), размером 10 на 10 см. Одновременно на пластины в качестве метчиков наносят стандартные растворы 100 мкгмл исследуемых веществ в этаноле. Количество наносимых метчиков определяется экспертом в каждом конкретном случае в зависимости от количества исследуемого образца, обстоятельств дела и прочих причин. Хроматографирование рекомендуется проводить в системах: 1) метанол концентрированный аммиак 100 1,5 2)циклогексан толуол.диэтиламин 75 15 10 После удаления растворителя пластинки просматривают в УФ-свете при Х=254 и =366 нм. Обработку пластин рекомендуется проводить одним из нижеперечисленных реактивов: 1. Реактив Марки (раствор формальдегида в серной кислоте). 2. Реактив Драгендорфа (раствор висмута субнитрата и йодида калия в разбавленной уксусной кислоте). 3. Раствор йодплатината (раствор хлорида платины и йодида калия в разбавленной соляной кислоте). При обнаружении на хроматограммах хроматографических зон, совпадающих по значению Rf, поглощению в УФ-свете и характеру окрашивания после обработки предлагаемыми реактивами с хроматографическими зонами стандартных растворов наркотических средств, проводят подтверждающее исследование методом хромато-масс-спектрометрии. Появление на пластинах после обработки приведёнными выше реактивами окрашенных хроматографических зон, не совпадающих по значению Rf с метчиками, также является причиной для проведения хромато-масс-спектрометрии.
2010
Для удаления внешних загрязнений (потожи- ровых выделений и прочих веществ экзо – или эндогенного характера, особенно находящихся на внешней поверхности объектов незначительных количеств исследуемых веществ, если таковые были обнаружены в ходе предварительного исследования) волосы и ногти последовательно отмывают 2 мл 0,2N раствора хлористоводородной кислоты и 2 мл метанола (или этанола), по 10 минут каждым Операция проводится до полного исчезновения в последнем растворителе, после его упаривания, следов наркотического средства. Присутствие исследуемых веществ выявляют описанным выше хромато-масс-спектральным методом, с одним исключением — прибор работает в режиме регистрации характеристических для исследуемых веществ или их трифторуксусных производных ионов, как описано в разделе 6.5.2. Отмытые объекты высушивают при комнатной температуре.
2010
Рекомендуется следующее оборудование фирмы «Хьюлетт Паккард» (США): 1. Газохроматографическая колонка ULTRA-1 или НР-5 MS с внутренним диаметром 0,25мм и длиной 30м или их аналоги. 2. Газовый хроматограф серии НР5890или НР6890. 3. Масс-селективный детектор НР5970или его более новые аналоги, работающие в режиме ионизации электроннымударом при70эВ. Расход газа-носителя и температурные условия подбираются индивидуально в зависимости от применяемой хроматографической системы на основании параметров удерживания исследуемых веществ. Типовые условия проведения исследований: 1 Хроматограф НР5890с колонкой ULTRA-1 внутренним диаметром 0,25мм и длиной 30метров 2 Газ-носитель гелий 3 Скоростьрасхода газа-носителя. 1,2млмин 4 Температура инжектора240°С, интерфейса280°С 5 Температура колонки программируется от 80до 280°Ссо скоростью 20градмин 6 Объем пробы 1 мкл 7 Способ введения без деления потока газа-носителя 8Параметрымасс-спектрометраустанавливаются ежедневно с помощью программы «AUTOTUNE», за исключением тока нити накаливания, которая устанавливается на 200—400вольт выше После проведения исследований масс-спектры, снятые с вершин хроматогра-фических пиков, сравнивают по стандартной методике с масс-спектрами библиотек «NIST98» и «WILEY275K» производства фирмы «Хьюлетт Паккард» (США), а также библиотеки стандартных масс-спектров исследуемых по данной методике веществ, составленной авторами. В разделе 6.8.1. приведены молекулярные и структурные формулы, а также масс-спектры этих веществ. Вещество считается идентифицированным при совпадении его масс-спектра с библиотечным более чем на 90 % и совпадении его времени удерживания со временем удерживания стандарта идентифицируемого вещества Предел обнаружения метода для всех веществ при использовании колонки ULTRA-1 длиной 30 метров и диаметром 0,32 мм, установленной на приборе НР6890 с детектором НР5973, для трифторуксусных производных амфетаминов составил 10-11 г.
2010
Выделения человека, особенно кровь, моча, а также секционный материал, являются обычными объектами исследования для установления факта употребления вещества или простого контакта с контролируемым веществом. Уровень содержания наркотиков в этих объектах может быть определён лишь в течение 3—5 дней после приёма. Нетрадиционные образцы: ногти и волосы удерживают наркотики и их метаболиты в течение более продолжительного времени (месяцы и годы). Лёгкость получения образцов и устойчивость наркотиков при нахождении в них подчеркивают «превосходство» над биологическими жидкостями человека. Например, образцы волос, ногтей, слюны, пота можно легко отбирать, не посягая на права человека, в противоположность отбору крови.
Разработка высокочувствительных и специфических методов иммунохимии и хромато-масс-спектрометрии, позволяющих определять незначительные концентрации наркотиков, стимулировали разработку методов исследования таких нетрадиционных образцов, как волосы и ногти. Основными преимуществами волос, ногтей и потожировых выделений человека как объектов исследования с целью установления присутствия остатков лекарственных препаратов и наркотиков являются: 1. Возможность устанавливать в организме человека факт употребления наркотиков спустя недели, месяцы или даже годы после окончания их приёма. 2. Возможность прослеживать во времени динамику поступления наркотика или лекарственного средства в организм. 3.Возможность осуществления скрытого отбора образцов, главным образом образцов волос и потожировых выделений на предметах одежды при проведении оперативно-розыскныхмероприятий. 4. Возможность исследования широкого диапазона концентраций наркотических и лекарственных средств — от субтерапевтических до сублетальных. 5. Возможность проведения комплексной оценки объектов, так как данные,получаемые при исследовании волос, ногтей, а также потожировыхвыделений и прочихзагрязнений на них, взаимодополняют иуглубляют друг друга. 6.Простотаотбора ихраненийпроб.
2010
Исследование остатков наркотических средств в отмытых от посторонних примесей образцах волос и ногтей проводят методом хромато-масс-спектро-метрии при использовании режима электронного удара при 70 эВ с последующим детектированием характеристических для исследуемых веществ ионов.
2010
Для удаления внешних загрязнений волосы и ногти отмывают 2N раствором хлористоводородной кислоты и метанолом (или этанолом) до полного исчезновения в последнем растворителе, после его упаривания, следов наркотического средства. Присутствие исследуемых веществ определяют по описанной выше методике хромато-масс-спектрального исследования, за исключением того, что прибор работает в режиме регистрации характеристических для исследуемых веществ или их трифторуксусных производных (далее ТФА-производных) ионов. Таблица 19 показывает время удерживания и характеристические ионы исследуемых веществ. По данной методике вещество считают идентифицированным при совпадении времени удерживания всех характеристических ионов, а также соотношения площадей их хроматографических пиков с аналогичными показателями стандартного образца Количество исследуемых характеристических ионов для каждого вещества определяется экспертом на основании выбранных им условий хроматографирования и используемого оборудования. При проведении экспертных исследований данное количество не может быть меньше 3. Отсутствие одного хроматографического пика характеристического иона в пределах 1,2 сек. времени удерживания при наличии всех других пиков указывает на отсутствие данного соединения в пробе. Разработанная методика при исследовании образцов волос весом 30 мг и ногтей весом 20 мг надёжно выявляет искомые вещества на уровне 0,5 нгмг. Рисунок 33 показывает графики количественного определения в волосах кокаина, героина, метадона, фенцик- лидина, морфина 2ТФА и героина. Соответствующие данным графикам статистические параметры уравнения линейной регрессии (Y=AX+B) представляет таблица 20.
2010
Исследование неизменённых амфетаминов и их аналогов методом масс-спектрометрии при использовании ионизации электронным ударом связано с определёнными трудностями, так как почти все они являются близкими структурными аналогами и имеют схожие, трудно различимые между собой масс-спектры. Например, МДМА и БДБ, МБДБ и МДЕА, метамфетамин и фентермин отличаются друг от друга расположением одной метальной группы, а метамфетамин и эфедрин с псевдоэфедрином — наличием или отсутствием одной гидроксильной группы. В масс-спектрах всех этих веществ нет выраженного молекулярного иона, максимальный пик обычно значительно превышает все остальные по интенсивности и находится в малоинформативном диапазоне от 50 до 90 mz.
2010
Получение ацильных производных амфетаминов, например после их обработки ангидридами различных кислот, приводит к значительному увеличению информативности масс-спектрометрии 103, 104, 167, 234, 299, 422. Кроме того, указанные вещества при хроматографическом определении дают более симметричные пики, что позволяет получать более точные результаты при количественном исследовании. Рисунок 28 показывает масс-спектры ТФА-производных МБДБ и МДЕА и соответствующие им схемы фрагментации. На рисунке чётко видны различия масс-спектров этих двух структурных аналогов. Аналогичным образом происходит фрагментация ТФА-производных эфедрина (псевдоэфедрина) и метамфетамина, которые образуют различимые между собой масс-спектры (см. рисунок 29). Анализ этого рисунка показывает, что гидроксильная группа в молекуле эфедрина значительно изменяет схему его фрагментации по сравнению с метамфетамином. У последнего ионы 118 и 91 mz — одни из самых интенсивных в масс-спектре и практически отсутствует молекулярный ион 245 mz. Для эфедрина картина обратная. Специфика фрагментации ТФА-производных амфетаминов позволяет по масс-спектрам проводить оценку их структуры. далее…
2010
Полученный сухой остаток исследуют методом ГХ-МС, как описано в разделе 6.3., однако масс-спектрометр работает в режиме регистрации характеристических ионов исследуемых веществ. Заключение о присутствии исследуемого соединения давали на основании совпадения времён удерживания и соотношения площадей пиков характеристических ионов, соответствующих соотношению их интенсивности в масс-спектре, полученном в режиме сканирования, для исследуемого вещества и стандарта-сравнения. Определению исследуемых веществ не мешают: никотин, котинин, кофеин, фенциклидин, фенобарбитал, метадон, кокаин, морфин 2ТФА, кодеин ТФА, 6-МАМ ТФА, каннабидиол, тетрагидроканнабинол, ацетилкодеин, каннабинол, морфин 2Ас, папаверин, а также другие вещества экзо – и эндогенного характера.